使用 Square One 比色皿架的吸光重复性
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比色皿吸光度测量的好坏取决于测量所使用的系统。经常进行背景和参考测量，可以解决基线漂移和因环境条件变化而引起的其他光谱变化问题。使用匹配的比色皿可以克服比色皿之间的差异。
测量采集参数的设置是为了提供尽可能高的信噪比。那么，为什么切换样品时基线会降至零以下？为什么吸光度为负值？为什么您的标准曲线相关性如此之差？答案可能就在您的系统中一个您可能想都没想过的部件中–您的比色皿架。
要获得准确的吸光度数据，需要设计精良的比色皿支架，使用户能够重复地取出和更换比色皿（图 1）。
图 1：即使遵守了最佳操作规范，不理想的设备也会影响实验结果。Square One 比色皿支架的设计可最大限度地减少因比色皿安装不当而导致的吸光度测量误差。
如果石英比色皿没有始终如一地放入比色皿固定器中，即使是最昂贵、最匹配的石英比色皿也无法提供准确的数据。比色皿应与支架紧密贴合，以便取出和更换比色皿时不会导致光谱数据发生变化。基线偏移到零以下和负吸光度值都是问题的直接警告信号。这些问题会使数据受到质疑，削弱对结果的信心。当这些问题发生时，您还能相信您刚刚采集的数据吗？
使用方形一号比色皿支架的重复性
您辛辛苦苦制作样品和设计实验。不要把所有宝贵的时间和精力浪费在比色皿架上，因为这样会影响您进行一致、可重复测量的能力。即使是最精确制备的样品，其测量结果的准确性也取决于测量系统。不要让比色皿架破坏您的工作。请使用 Square One 比色皿架，因为可靠的设备和周到的使用方法才能获得出色的数据。
有时，比色皿架 “感觉 “不对。您是否曾将比色皿放入比色皿固定器后，对比色皿的不稳定性提出过质疑？比色皿没有固定好时，光谱数据的可重复性如何？您的标准曲线是否与图 2 中的曲线一样不准确？
图 2：浓度与吸光度值相关性较差的标准曲线示例。吸光度的差异是由于蛋白质浓度、样品制备过程中的误差还是比色皿在支架中的重复放置问题？
使用 Square One，比色皿可被紧紧固定，而不会损坏比色皿脆弱的光学表面。将比色皿插入比色皿固定器时，用户会感觉到比色皿很牢固。
Square One 可为石英比色皿（图 3）和一次性塑料比色皿（图 4）提供可重复的数据。为了测试这一点，我们将比色皿从比色皿架中取出并更换 10 次，以进行吸光度测试。如图所示，无论使用石英比色皿还是塑料比色皿，得到的光谱叠加都非常一致。
图 3：将装有稀释的绿色食品染料的石英比色皿从比色皿支架中取出并更换 10 次后，Square One 的光谱重复性示例。光谱几乎完全重合，在 410 纳米波长处的平均吸光度为 0.47 AU，标准偏差仅为 0.0007 AU。
图 4：将装有浓度稍高的绿色食品染料的一次性比色皿从比色皿固定器中取出并更换 10 次后，Square One 的光谱重复性示例。即使使用一次性比色皿，光谱也几乎完全重合，在 410 纳米波长处的平均吸光度为 0.47 AU，标准偏差仅为 0.0008 AU。
关于 Square One 比色皿支架
Square One 比色皿支架可容纳 1 厘米路径长度的比色皿。每个支架包括三个带光纤耦合器的准直透镜、一个用于提高荧光测量灵敏度的集成镜、一个用于阻挡环境光的全集成盖，以及两个可接受直径为 12.5 毫米和 25 毫米滤光片的滤光片支架。与海洋光学光谱仪和光源配合使用时，Square One 是吸光、透射、荧光、散射或这些光学现象任意组合的理想选择。
其他吸收率测量技巧
有了包括 Square One 比色皿架在内的优化设备，您就可以将注意力转移到与精确吸光度测量相关的其他标准上了。以下是一些提示：
- 不同比色皿的吸收率可能不同。如果比色皿在所有方向上的路径长度都不相同，那么比色皿在样品架中的方向也会不同。为获得最佳精度，请始终使用同一比色皿。如果无法做到这一点，请确保比色皿每次放入样品架时的方向都相同。
- 按照建议的时间对光源进行预热（某些情况下最长可达 30 分钟）。光源输出将继续发生非常轻微的变化，直到光源处于热平衡状态，从而影响测量结果。
- 在软件中记录经常进行的暗测量和参考测量，以重新建立准确的基线。
- 切勿关闭光源或断开光纤以进行暗测量。相反，应在光源原点或比色皿支架的滤光槽处阻挡光源。确保所使用的物体能阻挡 100% 的光线；金属效果很好。
- 设置光谱仪积分时间，使参考光谱在计数满刻度的 80% 至 90% 处达到峰值。这样可以充分利用光谱仪的全动态范围，提高信噪比性能。
- 将频谱平均值设置得尽可能高，以提高信噪比 (S:N)。S:N 随平均值数量的平方根而提高。例如，将平均值设置为 9，S:N 将提高 3 倍。
- 增加箱车值可进一步平滑频谱中的噪点。这是一个随波长移动的平均值，因此箱车值为 2 时，每边会多出 2 个像素（共 5 个）的平均值，并将该平均值分配给中心像素。如果箱车值设置过高，光谱形状就会开始模糊，因此要谨慎使用这一功能。若要在不影响分辨率的情况下平滑数据，可将方车值设置为与光谱仪的像素分辨率相等。