吸光度测量解决方案

吸光度测量解决方案

海洋光学亚洲 市场部07 十二月 2022

  • 吸光度

吸光系数与入射光的波长以及被光通过的物质有关,只要光的波长被固定下来,同一种物质,吸光系数就不变。

吸光度(Absorbance)是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的以10为底的对数(即lg(I0/I1))),其中I0为入射光强,I1为透射光强,影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等。

吸光度:当入射光频率与物质分子的震动频率一致,或者入射光引起物质分子电子能级跃迁,都会产生光学吸收现象。溶液的浓度越高,穿过溶液的光也会相应地被吸收越多。

其他:入射光透过物质没有发生任何反应或者变化,直接透过的光即为透射光。弹性散射的发生会引起光改变方向,但是不会引起波长或者能量的变化,反之则为非弹性散射。

Lambert-Beer 定律:吸光度值与物质分子的浓和程成正比

如何根据您的应用选择不同的采样附件是至关重要的。这其中就包括您需要考虑您的样品是液体的还是气体的;样品的光学密度如何;是要原位测试,还是过程控制,或者是在一个反应腔室内。从应用出发进行附件筛选,海洋光学为您提供众多附件选择,从简单的实验室应用(比如比色皿和比色皿支架)到复杂的采样工具(比如透射探头和流动注射装置等等)。

吸光度与透过率关系

  • 测试样品的透过率
  • 透过率为透过光强度与原始光强的比值

如何根据您的应用选择不同的采样附件是至关重要的。这其中就包括您需要考虑您的样品是液体的还是气体的;样品的光学密度如何;是要原位测试,还是过程控制,或者是在一个反应腔室内。从应用出发进行附件筛选,海洋光学为您提供众多附件选择,从简单的实验室应用(比如比色皿和比色皿支架)到复杂的采样工具(比如透射探头和流动注射装置等等)。

如何确定未知样品的浓度

  • Lambert-Beer定律是一个线性方程
  • 使用已知浓度的标准溶液测试其吸光度值
  • 吸光度值和浓度之间可以建立一条线性关系的标准曲线
  • 最后通过测量未知样品的吸光度值,从线性关系曲线中读取该样品的浓度值
  • 基于吸光度的简单实现与易使用,吸光度被广泛运用于液体和气体的光谱测量技术中。吸光度光谱可以对物质进行定量鉴别或者对物质进行指纹认证,亦或可以对溶液中的分子进行浓度定量分析。

吸光度测量

基于吸光度的简单实现与易使用,吸光度被广泛运用于液体和气体的光谱测量技术中。吸光度光谱可以对物质进行定量鉴别或者对物质进行指纹认证,亦或可以对溶液中的分子进行浓度定量分析。

吸光度测量可以以多种形式呈现。或针对液体或对气体,而且还可以将该应用集成到工业应用环境和客户所关注的测试中。样品不再仅仅使用比色皿作为载体,流动池、浸入式探头、微量进样器、气体存储皿、微量比色皿等等都可以作为采样装置。

使用模块化光谱仪,我们可以针对特定的吸光度测量来选择不同波长范围和分辨率的光谱仪,而且还能在实验室或者现场对整套光学测量装置进行快速、方便地更改。事实上,基于海洋光学强大的光谱仪、光源和采样附件的产品线和灵活易用的搭配,可以针对不同的吸光度试验搭配出N中选择。

CUV系列比色皿支架

CUV-UV比色皿支架可以用于1 cm比色皿,通过SMA905接口的光纤耦合到海洋光学高灵敏度微型光纤光谱仪和光源,组成小型化的液体吸光度解决方案。这种紧凑的比色皿支架可用于全波段 (~200 -2000nm)的测量。

CVD系列比色皿

一次性比色皿有很高的化学稳定性,它既能应用在强酸环境也能用在强碱环境 。在生产时,它的模型是成组的,这保证了每个比色皿之间最小的吸光度误差。嵌入式窗口预防划伤光学通路。光程1cm,容积1.5-3 mL。

DH-2000系列氘钨灯光源

DH-2000-BAL为平衡型氘卤灯光源,它使用新型滤光技术平滑全波段光谱,同时消除氘灯在可见光波段的alpha-deuterium线。使用氘卤灯,可以应用在不同光谱范围的测试或者不同的样品测试中。所有的氘灯都存在alpha线,即在655nm附近有一个尖锐的,这个特征峰和其他氘灯特征线会导致氘卤灯输出强度的“不平衡”,简单地调节光谱仪的积分时间是不能解决这个问题的,而DH-2000-BAL很好地解决了这个问题。通过该光源,用户可以测量230-2500nm样品的吸收光谱,光源寿命1000小时。

QP400系列抗紫外老化光纤

QP系列高级光纤集合是耐用,高质量的配件,在信号发生微小变化时,仍能获得一致的结果。不锈钢铠装的外包材料使光纤在使用过程中有较好的机械耐受力。光纤末段是易于操作的金属接口—高精密度的SMA905连接器,提供更好的耦合效率。另外,抗紫外光纤内部采用高羟基材质,可以保证紫外波段的信号不会对光纤本身造成不可逆的破坏,从而导致透光率降低。QP400-SR系列光纤采用400微米纤芯,光纤长度2米,覆盖波段200-1100nm,外包材料为不锈钢铠装,弯曲半径16cm。

OceanView光谱分析软件

OceanView是海洋光学的旗舰级光谱应用软件,支持Windows,Mac OS和Linux系统,兼容海洋光学现有所有光谱仪。内置大量应用向导,能引导客户完成复杂的光谱应用测试(吸光度、透过率、反射率、荧光、拉曼、辐射测量等)。只需选择所需的测量应用,软件会一步一步引导,让您轻松地完成系统设置和数据采集。

Flame微型光纤光谱仪

Flame系列小巧坚固,大幅改进了内部设计,并集成了自动化生产工艺,在热稳定性与台间一致性方面领先同级产品。FLAME-S-UV-VIS覆盖范围200-850nm,光学分辨率1.33 nm,积分时间1ms-65s,狭缝25μm,像素2048,A/D转换16位。

解决方案参数

配置清单

吸光度测量的附件选择

如何为您的吸光度测量选择合适的采样附件?以下提供一些参考:

  • 测量使用环境与地点? 更精确地说,什么样的附件能满足您的现场和实验室,并且方便易用?如果测试样品能很简单地使用比色皿或者试管进行测量,那选择就可以扩展到比色皿支架或者其他支架类产品。如果需要进行实时的原位测量,或者流动液体的测量,可以选择透射形浸入式探头(不同光程可选)或者流动池等等。
  • 样品的性状:液体还是气体? 由于气体的特性,我们要么选择高浓度样品,要么选择长光程容器进行测量。根据不同的样品,10cm光程的容器一般都足够了,或者使用准直透镜直接接触到样品中进行测试。
  • 测试样品的光学密度如何? 光学密度OD值直接影响您对测试样品不同光程容器的选择。光学密度越高,所需要的光程就越短。比如,SpecVette™作为高浓度样品的理想配件,它的光程可以短至250µm,另外还有1cm和10cm的标准配件可选。另外一方面,低OD的样品需要长光程配件,比如可以扩展到500cm的长光程流通池就是比较好的选择。如果您需要了解更多样品浓度与光程之间的关系信息,请参考比尔-朗博定律的具体介绍。
  • 样品的体积如何? 测量样品的体积也影响采样附件的选择。针对低于2uL的微量样品,可以选择微量比色皿和微量取样器。
  • 针对连续流动的样品怎么选择?形流动注射装置,毛细管电泳池,还包括那些可以使用泵装置/塑料套管连接的装置都是流动样品测量吸光度的不二之选。

吸光度测量采样附件选择一览表

类型可选最佳应用环境
比色皿石英和塑料实验室
比色皿支架 标准或者多用途;恒温控制;可与光谱仪集成 实验室;精确温控实验;
小体积,短光程采样5 µl 比色皿;250 µm短光程附件核酸和蛋白质或者其他小体积样品分析;光学密度较高的样品(比如墨水和染料)测试
流通池 Z形流通池取样分析;小体积样品池;微量液体的测试;低浓度测试;过程控制
浸入式探头 苛刻的实验环境;高温、高压环境实验室使用;苛刻的化学或者物理环境
吸光度标准品NIST可追溯标准品;UV (200-450 nm) ;可见 (400-900 nm)质量控制;对吸光度要求很高的应用环境

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